ELISA實驗的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記，其中，結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。進行檢測時，樣品中的受檢物質(抗原或抗體）與固定的抗體或抗原結合。通過洗板除去非結合物，再加入酶標記的抗原或抗體，此時，能固定下來的酶量與樣品中被檢物質的量相關。通過加入與酶反應的底物后顯色，根據顏色的深淺可以判斷樣品中物質的含量，進行定性或定量的分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的靈敏度。

那么ELISA試劑盒需把握的關鍵有哪些？

    1.在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。一切試劑瓶蓋須蓋緊以避免蒸發和污染，試劑避免受到微生物的污染，因為蛋白水解酶的干擾將導致呈現錯誤的結果。

    2.小心汲取試劑并嚴格遵守給定的孵育時刻和溫度。請注意在汲取標本/規范品，酶結合物或底物時，di一個孔與一個孔加樣之間的時刻距離假如太大，將會導致不同的 “預孵育"時刻，然后明顯地影響到測量值的準確性及重復性。

    3.試劑盒保存：部分試劑保存于-20℃，部分試劑保存于2-8℃，具體以標簽上的標示為準。  

    4.濃洗滌液會有鹽分出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。

    5.剛敞開的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質，此為正常現象，不會對試驗結果造成任何影響。

    6.一切的樣品都應管理好，依照規則的程序處理樣品和檢測設備。